如果只是做蛋白定性鑒定,三種厚度(0.75、1.0和1.5mm)都可以。 如果后續實驗做到WB,IP等則用1.0和1.5mm的更多。 如果根據上樣體積,則以下參數可供參考: 0.75mm厚度可上樣40ul 1.0mm厚度可上樣60ul 1.5mm厚度可上樣100ul 注:以上數據只適用于biotide和伯樂電泳玻璃板及同型玻璃板。
跑完電泳后,玻璃板需要及時清洗干凈,把緩沖液和殘膠都清洗干凈后,用雙蒸水或者超純水沖洗玻璃板表面,晾干備用。 需要注意的是不干凈的玻璃板尤其是表面有殘膠或者有污漬會影響膠的形成和產生不規則氣泡。
博泰斯轉印濾紙厚度為1mm,用后清洗、鋪平晾干;可重復3次。
在Westernblot的轉膜過程中,轉膜濾紙的作用是為轉印“三明治”提供平整的接觸面,使膠和膜接觸均勻,結果更趨穩定真實。
用伯樂制膠架(或類似制膠架)配膠時,時有漏膠現象發生,是電泳玻璃板底部與制膠墊之間密閉不夠導致下層膠漏出。 原因有以下幾種 1 WB玻璃板底部有缺口 2 制膠墊用太久、老化疏松 3 制膠底座上面夾子的彈簧松動 針對上述原因逐一排查即可找到解決辦法。
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