【貨號規格】
WB1601: 10 ml
【產品特點】
快速—— 5分鐘快速完成封閉。
可靠——無蛋白配方,與抗體無交叉反應。
應用廣——無磷酸化蛋白,無生物素,尤其適合磷酸化特異抗體及生物素檢測系統。
高效——只結合封閉膜而不結合蛋白,因此不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點,與傳統的牛奶和BSA封閉相比信噪比更高。
節省抗體——使用本封閉劑后,所需的最適抗體濃度低于常規使用濃度,可大大節省抗體使用量。
快速封閉液原理:在WB實驗中,封閉是指用與后續實驗不發生作用的介質對PVDF膜或者NC膜上沒有結合目的蛋白的區域通過作用力結合占據空間以達到物理阻隔的效果。封閉的目的是防止一抗或二抗和轉印膜的非特異性吸附,降低或消除背景,以得到更好、更真實的實驗結果。
【產品說明】
本快速封閉液專為快速高效封閉western blotting膜而設計。所含封閉劑無動物來源蛋白成分,避免了抗體與封閉劑的非特異結合,最大程度地降低了背景。同時,本封閉劑無內源的磷酸化蛋白及生物素,對磷酸化特異抗體及生物素檢測也不會產生干擾。本封閉劑不與蛋白產生非特異性結合,因而只封閉膜而不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點,大大提高了抗體檢測靈敏度。實驗表明,本封閉劑對許多抗體都有不同程度的信號增強作用。然而這種信號增強作用因抗體而異,對某一特定抗體,并不一定具有確定的信號增強作用。
需要注意的是,沒有任何一種封閉劑能適合所有抗原和抗體的檢測系統。如出現本試劑不適合的抗體,請替換使用其他種類的封閉劑如BSA或脫脂奶粉等。
【封閉方法】
a. 轉膜結束后,將轉印膜放入到雜交孵育盒中,加入10-20ml TBS/T或PBS/T。
b. 往TBS/T或PBS/T中加入1/100體積的快速封閉液,置于搖床輕輕搖動,室溫封閉5分鐘(即配即用)。
c. 用TBS/T或PBS/T稀釋抗體繼續進行下一步抗體雜交孵育。
注意:由于本封閉劑和傳統基于蛋白成分的封閉液的原理不同,建議在整個western blotting過程中盡量不要使用BSA或脫脂奶粉等基于蛋白成分的封閉液來稀釋抗體和洗膜等,以充分發揮本封閉劑對信號的增強作用。
快速封閉液100× 無蛋白快速封閉液 WB快速封閉液